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當前位置:首頁新聞中心酶標儀在糞便鈣衛(wèi)蛋白檢測過程中的應用

酶標儀在糞便鈣衛(wèi)蛋白檢測過程中的應用

更新時間:2017-07-28點擊次數(shù):2010

酶標儀應用雙抗體夾心法,基于不同位點的兩種單 克隆抗-人鈣衛(wèi)蛋白抗體。標準品、質(zhì)控品和稀釋后的待測樣本加入到具有高親和力的單克隆抗-人鈣衛(wèi)蛋白抗體包被的微孔板微孔內(nèi)。在*次孵育步驟中,樣本中鈣衛(wèi)蛋白被固相抗體捕獲。加入酶聯(lián)物后第二次孵育時,形成以下復合體:捕獲抗體-人鈣衛(wèi)蛋白-酶標抗體結(jié)合物。接著加入TMB底物進行顯色,加入酸液終止液終止顯色反應,溶液變成黃色。黃色亮度與樣本中鈣衛(wèi)蛋白濃度成正比。zui后在酶標儀450nm波長處測量吸光度。做出標準品濃度對相應OD值的標準曲線,在其上計算出樣本濃度。有些試劑盒廠家采用雙波長檢測,酶標儀450nm(單波長測量時使用450nm,如果zui高標準品的吸光度系數(shù)超過酶標儀的范圍,應直接于450nm(參考630nm620nm)雙波長測量。

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